Впервые провел исследование Кэрри Муллис в 1983 году. До этого, узнать возбудителя болезни можно было невозможно, равно, как и получить образец болезнетворного генетического материала.
Сам вирус, после открытия анализа, стали изучать только в 1989 году, тогда же его отделили от вирусов гепатита А и В. Было выделено 40 разновидностей гепатита С, а также установлено, что он способен мутировать. Именно в этом основная особенность и опасность вируса, он может приспосабливаться и вырабатывать антитела, благодаря которым многие препараты, к сожалению, не способны победить болезнь.
Преимущества ПЦР-диагностики заключаются в:
- определении самого вируса-возбудителя болезни и выделении его вида;
- малом количестве ошибок, т.к данным методом исследуется ДНК вируса;
- высокой чувствительности, что позволяет обнаружить вирусы на начальных стадиях, когда распространение еще в процессе.
Разновидности ПЦР-диагностики и расшифровка их результатов
Медиками проводится два вида ПЦР-исследований крови:
- качественный анализ
- и количественный
А также отдельно стоит подчеркнуть возможность выделения генотипа, поступившего в кровь вируса.
Качественный анализ
Метод качественного исследования назначается с целью обнаружения вируса в крови, поэтому результат анализа может быть только в двух вариациях:
- обнаружено
- или не обнаружено.
Результат «Не обнаружено» является нормой. Однако возможен ложноотрицательный ответ, что связано с крайне малым количеством вируса в крови.
Но если качественный анализ имеет результат «Обнаружено», такое заключение указывает на наличие возбудителей болезни в крови обратившегося.
Количественный анализ
Количественный анализ ПРЦ служит для определения концентрации вируса в крови или, иными словами, вирусную нагрузку на организм. Анализ позволяет узнать количество вирусов на единицу взятой у больного крови, определить степень виремии. В свою очередь, виремия – это состояние, определяемое в медицине, когда вирусы попали в ток крови и распространяются по всему организму. Также результат количественного анализа позволит судить о заразности больного.
Расшифровывается результат количественного анализа следующим образом. В результате анализа указаны цифры, это – количественный показатель вирусной нагрузки. Для выражения концентрации вирусов используется исчисление в МЕ (международная единица) на мл, либо количество копий на мл. Наиболее часто используется шифрование в МЕ. Как правило, 1 МЕ/мл сравнимо с 4 копиями/мл.
Соответственно, по объему обнаруженных вирусов можно судить о тяжести заболевания.
Расшифровка цифрового обозначения количественного анализа на гепатит С | |
до 1,8*102 МЕ/мл (7,5*102 копий/мл) | значение вирусной нагрузки ниже линейного диапазона, это означает, что выполняемый анализ ПРЦ не в состоянии обнаружить искомый ген возбудителя гепатита, однако же, вирус в крови найден, но в очень малой концентрации |
до 4*106 МЕ/мл или 4000000 МЕ/мл (2*106 копий/мл) | низкая вирусная нагрузка, значение виремии низкое |
более 4*106 МЕ/мл (2*106 копий/мл) | высокое значение вирусной нагрузки |
более 2*108 МЕ/мл (1*108 копий/мл) | концентрация вирусной нагрузки выше линейного диапазона, значение виремии высокое |
Количественный анализ ПРЦ может назначаться во время противовирусной терапии, на разных ее сроках. Как правило, это происходит на 1-й,4-й, 12-й и 14-й неделях. Необходимо исследование, в данном случае, для понимания эффективности проводимого лечения, когда результат не оправдывает ожиданий, терапию корректируют и ждут следующего срока для проведения анализа.
В зависимости от стоимости исследования, оно может проводиться двумя способами:
- недорогим Р-ДНК методом, который наиболее часто, собственно, и используется. Его недостаток в невысоком пороге чувствительности – искомый ген обнаруживается от 500 МЕ на мл крови;
- более дорогостоящим ТМА способом, который позволяет обнаружить во взятой крови нуклеиновые кислоты вирусных клеток. Благодаря этому, его порог чувствительности начинается от 5-ти МЕ на мл. Его стоимость окупается в том плане, что ТМА диагностику достаточно провести единожды, в отличие от предыдущего метода, ведь чтобы получить достоверный результат необходимо повторять исследование.
Стоит принять во внимание, что по полученным данным исследования невозможно определить степень изменений, произошедших в печени. Эту информацию могут предоставить только биохимия, биопсия или эластометрия.
Генотипирование вируса гепатита
Метод ПРЦ-исследования крови также позволяет определить генотип попавшего в организм вируса. Врачу результат анализа полимеразной цепной реакции необходим для подбора адекватной противовирусной терапии.
Всего медицине известно 11 генотипов гепатита С, шифруемых цифровым кодом, и множество субтипов под буквенной шифровкой. Наиболее важно обнаружить один из пяти генотипов вирусного гепатита С: 1а, 1b, 2а, 2b или 3а. Из них, самым часто обнаруживаемым является тип 1b, реже встречаются 3а, 1а и 2а.
1b вызывает хронизацию воспалительного процесса в 90% случаев, течение заболевания данного типа осложнено, есть большая вероятность развития цирроза или рака печени. А, например, 3а перетекает в хронический гепатит в 35% случаев и развивается со стеатозом и выраженным поражением желчевыводящих каналов.
Что влияет на результат?
К сожалению, ложных результатов современная медицина исключить пока не в состоянии. Они возможны при:
- нарушении процесса взятия крови и ее транспортировке в неправильных условиях;
- имеющихся в крови ингибиторах, как химической, так и белковой природы;
- наличии гепарина в образце крови.
Как подготовиться к анализу?
Чтобы результат анализа соответствовал действительности, важно правильно подготовиться к сдаче крови. Для этого необходимо:
- сдавать кровь натощак, чтобы крайний прием пищи состоялся не менее 8-ми часов назад;
- с утра, если есть желание, выпить только воды, чай и, тем более, кофе пить перед анализом нельзя;
- сдавать кровь только в спокойствии;
- за час до того, как войти в манипуляционный кабинет, не курить;
- за сутки до предполагаемой сдачи крови не поддаваться стрессам, выполнять только посильные физические действия, а также не менять схему питания;
- желательно прийти к лаборанту после полноценного сна;
- важным правилом является сдача крови до приема лекарств или же после их отмены выдержать 10-12 дней, но, в то же время, если назначены больному гормональные препараты, то их график приема нарушать запрещено;
- не сдавать кровь после проведения рентген-обследований и физиотерапии.
Частые вопросы
Какой метод исследования крови используется при гепатите С?
Для исследования крови при гепатите С используется метод ПРЦ (полимеразной цепной реакции).
Для чего нужен метод ПРЦ при гепатите С?
Метод ПРЦ используется для обнаружения и определения вирусной РНК гепатита С в крови пациента.
Как действует метод ПРЦ при исследовании крови на гепатит С?
Метод ПРЦ основан на умножении исходной вирусной РНК гепатита С в крови пациента с помощью специальных ферментов. Затем полученные копии РНК анализируются с помощью специальных проб и аппаратуры для определения наличия вируса гепатита С.
Полезные советы
СОВЕТ №1
При исследовании крови на гепатит С с помощью ПРЦ-метода важно обратить внимание на качество лаборатории, где будет проводиться анализ. Убедитесь, что лаборатория имеет аккредитацию и сертификаты качества, чтобы быть уверенными в достоверности результатов.
СОВЕТ №2
ПРЦ-метод позволяет обнаружить генетический материал вируса гепатита C в крови. Для более точного и надежного результата рекомендуется повторить анализ через определенный промежуток времени. Это позволит исключить ложноположительные или ложноотрицательные результаты и подтвердить или исключить наличие гепатита C.
СОВЕТ №3
ПРЦ-метод является одним из самых чувствительных и специфичных методов диагностики гепатита C. Он позволяет выявить вирус уже на ранних стадиях инфекции, когда другие методы могут не дать достоверного результата. Если у вас есть подозрение на наличие гепатита C, рекомендуется обратиться к врачу и пройти исследование крови с использованием ПРЦ-метода.